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登革热抗原NS1早期检测试剂登革热病毒是黄病毒属,主要分布于热带和亚热带地区。世界上一半以上的人口居住于具有登革热潜在传播风险的地区,登革热是导致人类发病和死亡严峻的虫媒病毒疾病 1。登革热病毒有 4 种不同但抗原相关的血清型,通过蚊(主要是埃及伊蚊、白纹伊蚊传播和波利尼西亚斑蚊)传播。
更新时间:2020-07-03
登革热抗原NS1早期检测试剂
Panbio Dengue Early ELISA
产品目录号 01PE40
Panbio Dengue EARLY ELISA 是一种登革热NS1 抗原捕获 ELISA。 用于定性检测血清中的 NS1 抗原, 辅助临床实验室诊断出现登革热临床症状的患者。 Panbio Dengue EARLY ELISA 应该与其它登革热血清诊断法联用。
登革热病毒是黄病毒属,主要分布于热带和亚热带地区。世界上一半以上的人口居住于具有登革热潜在传播风险的地区,登革热是导致人类发病和死亡严峻的虫媒病毒疾病 1。登革热病毒有 4 种不同但抗原相关的血清型,通过蚊(主要是埃及伊蚊、白纹伊蚊传播和波利尼西亚斑蚊)传播。
登革热病毒感染的临床表现各不相同,从亚临床表现到致命。依据严重程度,该疾病被分为以下等级:非特异性发热疾病,典型登革热,登革出血热(DHF)(1 级和 2 级),和登革休克综合征(DSS)(3 级和 4 级)1。典型登革热的特征是突然发热并至少伴随以下 2 种症状:头痛、眼眶后疼痛、肌痛、关节痛、皮疹、出血表现或白血球减少症 2。双相发热病程常见失眠和厌食,失去味觉或口苦。DHF 和 DSS 是严重的潜在致命性并发症,通常与感染第二种血清型有关 3。
登革热的早期诊断允许进行早期的支持疗法和监控。这降低了 DHF 或DDS 等并发症发生的风险,尤其是在登革热流行的国家 4。
通过ELISA 检测登革热NS1 抗原是一种非常重要的方法,因为它能够在血清转化之前进行感染检测。 从发病后的第 1 天直到第 9 天都能在血清中检测到NS1 抗原 5,6,7(见图示)。这区别于 IgM 抗体,因为 IgM 抗体直到发病后 3-5 天后才检测得到。继发性登革热病毒感染的特征是高 IgG , 水平且其峰值检测窗口是在发病后的 6-15 天。这可能伴随着 IgM 水平升高 10,11。Panbio Dengue IgG Capture ELISA 用于检测登革热感染的 IgG 抗体水平相对于阈值特异性升高。该试验不用于检测既往感染引起的低水平 IgG 抗体,这种情况通常见于地方性流行区的较多人群。为了为准确地从发病后的不同阶段诊断登革热患者,应该使用Panbio Dengue EARLY ELISA (01PE40),Panbio Dengue lgM Capture ELISA (01PE20) 和 Panbio Dengue lgG Capture ELISA (01PE10)三者相结合的方法。
血清中存在的登革热 NS1 抗原,与微孔板上聚苯乙烯表面附着的抗 NS1 抗体相结合。洗去剩余的血清并添加 HRP 标记的抗 NS1 单克隆抗体。在培养完成后清洗微孔,再添加无色的底物系统 - 四甲基联苯胺/ 过氧化氢(TMB 显色液)。底物被酶水解后,TMB 显色液变蓝。用酸终止反应后,TMB 变黄。显色表示测试样本中存在登革热NS1 抗原。
8. 阴性质控品– 1 瓶,白色瓶盖,1.2mL 人血清(含 0.1%叠氮话钠和 0.005%硫酸庆大霉素)。有效期内储存于 2-8℃可保持稳定。
Proclin™ 300 是 Rohm 和 Haas 公司的注册商标。
需要但未提供的材料
1. 精确、可调节的微量移液器,含一次性吸液头(5-1000μL 容积)
2. 去离子水
3. 标板清洗系统
4. 酶标仪,含 450nm 滤波器
5. 计时器
6. 刻度量筒
7. 烧瓶
8. 用于稀释的试管或微滴定板
用于体外诊断
3. 不可使用黄疸或脂血症血清,以及出现溶血或微生物生长的血清。
4. 不可加热,否则血清将失去活性。
5. 在开始检测前所有试剂必须平衡至室温(20-25℃)。检测受温度变化的影响。微孔板在达到室温
(20-25℃)之前不可从密封袋中取出。
6. 直接用干净的吸液头从试剂瓶中吸出试剂。转移试剂可能导致污染。
7. 未使用的微孔应该立即重新密封并储存于干燥环境中。否则将产生错误结果。
8. 底物系统:
(a) 由于 TMB 易受金属离子的污染,所以底物系统不能与金属表面接触。
(b) 避免长时间阳光直射。
(c) 有些清洁剂可干扰 TMB 的性能。
TMB 可能呈现淡蓝色,这不影响底物的活性或测定结果。
9. 某些试剂盒组成包含叠氮话钠,叠氮话钠可能与铅或铜管反应形成极易爆炸的金属叠氮话合物。通过管道装置处理这些试剂时,请用大量清水冲洗以避免叠氮化物在排水管内累积。
10. 叠氮话钠还抑制酶标物的活性。在添加酶标物时必须使用干净的吸液头,避免携带其它试剂的叠氮话钠。
登革热抗原NS1早期检测试剂