产品列表PRODUCTS LIST

首页>产品中心>传染病快速检测试剂系列>登革热>登革热病毒捕获法IgG抗体检测试剂盒
登革热病毒捕获法IgG抗体检测试剂盒

简要描述:

登革热病毒捕获法IgG抗体检测试剂盒
Panbio Dengue IgG Capture ELISA
产品目录号01PE10
预期用途
Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于推断性定性检测登革热病毒(1-4血清型)继发性感染患者的IgG抗体升高,辅助临床实验室诊断出现登革热病毒感染临床症状的患者,而且应该与Panbio Dengue IgM Capture ELIS

更新时间:2020-07-03

发邮件给我们:276502451@qq.com

分享到: 1
在线留言

登革热病毒捕获法IgG抗体检测试剂盒

Panbio Dengue IgG Capture ELISA

产品目录号01PE10

预期用途

Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于推断性定性检测登革热病毒(1-4血清型)继发性感染患者的IgG抗体升高,辅助临床实验室诊断出现登革热病毒感染临床症状的患者,而且应该与Panbio Dengue IgM Capture ELISA 和Dengue Early ELISA联用。Dengue Early ELISA也可检测原发性登革热病毒感染。Panbio Dengue IgG Capture ELISA最早可在疾病发作后3天检测到提示继发性登革热感染的高IgG, 水平。然而,准确诊断继发性感染的峰值检测窗口是在疾病发作后6-15天。阳性结果是推断出来的,必须经过病毒分离培养、配对血清分析、免疫组织化学抗原检测或病毒核酸检测来确认登革热病毒感染。

 

概述

登革热病毒是黄病毒属,主要分布于热带和亚热带地区。世界上一半以上的人口居住于具有登革热潜在传播风险的地区,登革热是导致人类发病和死亡严峻的虫媒病毒疾病1。登革热病毒有4种不同但抗原相关的血清型,通过雌蚊主要是埃及伊蚊、白纹伊蚊传播和波利尼西亚斑蚊传播。

 

登革热病毒感染的临床表现各不相同,从亚临床表现到致命。依据严重程度,该疾病被分为以下等级:非特异性发热疾病,典型登革热,登革出血热(DHF)(1级和2级),和登革休克综合征(DSS)(3级和4级)1。典型登革热的特征是突然发热并至少伴随以下2种症状:头痛,眼眶后疼痛,肌痛,关节痛,皮疹,出血表现,和白血球减少症2。双相发热病程常见失眠和厌食,失去味觉或口苦。DHF和DSS是严重的潜在致命性并发症,通常与感染第二种血清型有关3

 

在地方性流行登革热感染的国家,大部分成年患者会出现继发性登革热感染4。利用ELISA方法检测登革热病毒的IgG抗体特异性升高是鉴别继发性登革热感染非常重要的诊断方法。继发性感染患者并发症的发生几率较高5,6。传统上,血凝抑制试验(HAI)滴度被用于划分原发性或继发性感染。当前的界定方法是采用及时分离至少7天的配对血清标本检测,急性标本的HAI滴度> 1:1280被认为患者感染了继发性黄病毒7

 

Panbio Dengue IgG Capture ELISA是除HAI检测之外另一种可继发性登革热感染的血清学进行诊断的方法。

如下所示,继发性登革热病毒感染的特征表现为高IgG ,水平,同时可能伴随IgM水平升高8。Panbio Dengue IgG Capture ELISA用于检测登革热感染的IgG抗体水平相对于阈值特异性升高。该试验不用于检测既往感染引起的低水平IgG抗体,这种情况通常见于地方性流行区的较多人群。因此,高IgG ,水平(> 22 Panbio单位)提示继发性登革热病毒感染。

 

检测原理

血清中存在的登革热病毒IgG抗体,与微孔测试条(测定板)上聚苯乙烯表面包被的抗人IgG抗体结合。用抗原稀释剂将浓缩的重组登革热1-4型抗原溶液稀释到正确的工作容积。用昆虫细胞表达系统产生抗原,用特异性单克隆抗体纯化抗原。在稀释后的抗原中添加等体积的辣根过氧化物酶(HRP)标记单克隆抗体(MAb),形成抗原MAb复合物。清洗测定板上的剩余血清,将抗原MAb复合物添加到测定板中。然后这些抗原MAb复合物与血清登革热特异性IgG抗体结合。在培养完成后清洗微孔,再添加无色的底物系统 - 四甲基联苯胺/过氧化氢(TMB显色液)。底物被HRP(如存在)水解后,显色液变蓝。用酸终止反应后,TMB变黄。显色表示测试样本中存在抗登革热IgG抗体。

 

提供的材料

  • 抗人IgG包被微孔 - (测定板
    (12x8孔)。即用型。未使用的微孔应该立即重新密封并储存于干燥环境中。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 登革热1-4型抗原(重组) - 1瓶,无色瓶盖,包含150μL(红色)浓缩的1、2、3和4型登革热病毒抗原。未使用的稀释抗原必须丢弃。浓缩抗原在有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 清洗缓冲液(20倍) - 1瓶,60mL 20倍浓缩磷酸盐缓冲盐水(pH 7.2 – 7.6),含吐温 20和防腐剂(0.1% Proclin™)。低温可能结晶。若去除结晶在37孵育液体澄清。混合均匀。用19体积的蒸馏水稀释1体积的清洗缓冲液。稀释后的缓冲液可在2-25储存一周。
  • 样本稀释剂 – 2瓶, 50 mL(粉色)。即用型。Tris缓冲生理盐水(pH 7.2 – 7.6),含防腐剂(0.1% Proclin™)和添加剂。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 抗原稀释剂 – 1瓶,50mL(无色)。即用型。磷酸盐缓冲液,含防腐剂(0.1% Proclin™和0.005%庆大霉素)。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • HRP标记单克隆抗体示踪剂 – 1瓶,7mL(绿色)。即用型。辣根过氧化物酶(HRP)标记单克隆抗体示踪剂,含防腐剂(0.1% Proclin™)和蛋白稳定剂。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • TMB显色液(TMB) - 1瓶,15mL。即用型。3,3’,5,5'-四甲基联苯胺和过氧化氢的混合物,存放于枸橼酸盐缓冲液中(pH 3.5 – 3.8)。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 反应控制品 – 1瓶,红色瓶盖,200μL人血清(含0.1%叠氮话钠和0.005%硫酸庆大霉素)。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 校准品 – 1瓶,黄色瓶盖,850μL人血清(含0.1%叠氮和0.005%硫酸庆大霉素)。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 阴性质控品 – 1瓶,绿色瓶盖,200μL人血清(含0.1%叠氮和0.005%硫酸庆大霉素)。有效期内储存于2-8可保持稳定。
  • 终止液 – 1瓶,红色瓶盖,15mL。即用型。1M磷酸。有效期内储存于2-25可保持稳定。

Proclin™ 300是Rohm 和Haas公司的注册商标。

 

需要但未提供的材料

  • 精确、可调节的微量移液器,含一次性吸液头(5-1000 μL容积)
  • 去离子水
  • 标板清洗系统
  • 酶标仪,含450nm滤波器
  • 计时器
  • 刻度量筒
  • 烧瓶
  • 试管或微滴定板,用于稀释血清

 

注意事项

用于体外诊断

  • 在制备质控品的过程中使用的所有人源材料已经过人类免疫缺陷病毒1/2(HIV 1 /2)抗体、丙肝(HCV)和乙肝表面抗原的检测,结果为阴性。但是,任何测试方法都不能完全确信,且所有人源质控品和抗原都应按照潜在传染性材料处理。疾病控制和预防中心以及美国国立卫生研究院建议将潜传染原按照生物安全二级处理
  • 该测试只能使用血清执行。尚未建立使用全血、血浆或其它标本基质的方法。
  • 不可使用黄疸或脂血症血清,以及出现溶血或微生物生长的血清。
  • 不可加热,否则血清将失去活性
  • 在开始检测前所有试剂必须平衡至室温(20-25)。检测受温度变化的影响。微孔板在达到室温(20-25)之前不可从密封袋中取出。
  • 直接用干净的吸液头从试剂瓶中吸出试剂。转移试剂可能导致污染。
  • 未使用的微孔应该立即重新密封并储存于干燥环境中,否则将产生错误结果。
  • 底物系统:
  • 由于TMB易受金属离子的污染,所以底物系统不能与金属表面接触。
  • 避免长时间阳光直射。
  • 有些清洁剂可干扰TMB的性能。
  • TMB可能呈现淡蓝色,这不影响底物的活性或测定结果。

 登革热病毒捕获法IgG抗体检测试剂盒

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
在线客服
电话
86-020-89024386/84456072
手机
13903078903