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进口寨卡病毒IgM抗体检测试剂(德国IBL)可用于人血清和血浆(柠檬酸盐)中寨卡病毒IgM抗体的定性检测。
更新时间:2019-04-29
进口寨卡病毒IgM抗体检测试剂(德国IBL)
【产品名称】
通用名称:寨卡病毒IgM检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品规格】
96T/盒
【预期用途】
试剂盒可用于人血清和血浆(柠檬酸盐)中寨卡病毒IgM抗体的定性检测。
【检测原理】
试剂盒采用酶联免疫法。微孔中预包被有抗人IgG,用于结合样品中相应的抗体。洗板后,去除非结合的样品。再加入寨卡病毒原液,再次洗板后,再加入生物素化的寨卡病毒抗体。加入链霉亲和素标记结合物(酶联物),与固相的特异性的寨卡病毒合物结合。加入TMB底物液后,微孔中显蓝色。显色的强度与病人样品中寨卡病毒IgM抗体的量成正比。加入终止液终止酶反应,形成黄色终点产物。后在酶标仪处450 nm读数。
【检测方法】
试剂准备
试验前,将所有试剂,样品,质控品平衡至室温(20~25℃)
寨卡病毒抗原:
每瓶加入1mL稀释洗涤液溶解,缓慢加入,室温下静置温育15min,制成即用型抗原液。此抗原液在2~8 ℃可稳定保存1天。
洗涤液:
1个单位的浓缩洗涤液+19个单位的双蒸水。
如:10mL浓缩洗涤液+190 mL双蒸水。稀释洗涤液在室温下能稳定保存5天。开瓶后,浓缩的洗涤液在2~8℃可稳定保存至有效期.
检测步骤
试验前,仔细阅读说明书。严格执行说明书要求才能得到优质结果。如试验使用自动洗板机,建议每孔350µL,洗板5次(如手工洗,则每孔300µL,洗板3次)。试验前,确定好样品,质控品的加样布局方案。取所需板条置于板架上。
至少设
1孔(如A1) 空白对照
1孔 (如B1) 阴性质控
2孔 (如C1+D1) 临界质控
1孔(如E1) 阳性质控
如觉得有必要,建议样品和质控品都作双份检测。
试验应按同样的加样顺序加取试剂,避免不同的时间间隔造成误差。
使用新的一次性加样枪头,加各质控品,样品
调节恒温箱为37±1℃
注意:洗涤步骤很关键。不充分的洗板,会导致不精确或错误上升的吸光度值。
蓝色溶液在孵育过程中变为黄色。
注意:强阳性样品会导致色原产生沉淀,沉淀的产生会对读数产生影响。所以先用阴性基质进行预稀释,建议1:1的比例稀释,然后,再1个单位的预稀释样品+100个单位的样品稀释液。终结果(以U计算)乘以预稀释因子2即可
【结果计算】
用A1空白对照孔对酶标仪进行调零
如遇技术问题,酶标仪不能调零。 所测样品的吸光度值减去空白对照的读数值,
即可得到可靠的读数。
在酶标仪处450 nm处测读所有质控品和样品的吸光度值。620 nm作为参考波长。
如进行双孔检测,计算吸光度均值。
实验有效性标准
如试验有效,必须满足以下要求
·空白对照(A1): 吸光度值< 0.100
·阴性质控(B1): 吸光度值< 临界读数
·临界质控(C1+D1) 吸光度值 0.150~1.300
·阳性质控(E1) 吸光度值> 临界读数
如上述标准没满足,试验视为无效,试验应重测。
结果计算
临界读数是双孔临界质控的吸光度均值
示范: 临界吸光度值0.39 +临界吸光度值0.37=0.76 / 2 = 0.38
即吸光度值=0.38
进口寨卡病毒IgM抗体检测试剂(德国IBL)
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