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登革热检测试剂的检测原理究竟是什么呢?
点击次数:13 发布时间:2021-03-25
   登革热病毒是黄病毒属,主要分布于热带和亚热带地区。通过蚊子传播,主要是埃及伊蚊和白纹伊蚊。登革热病毒感染可导致一系列的临床症状,从不明显的症状到致死性的出血性疾病。典型登革热或断骨热的特征是突然发热、剧烈头痛、肌痛、关节痛和皮疹。双相发热病程常见失眠和厌食,失去味觉或口苦。登革出血热和登革休克综合征都是严重的并发症,通常与感染第二种血清型有关。利用 ELISA 方法检测登革热病毒的 IgM 抗体是非常重要的程序,尤其是对于继发性登革热病毒感染,继发性感染患者并发症的发生几率较高。尽管检测水平在感染后八个月仍存在,登革热出现三至五天后便可检测到血清 IgM 抗体且通常可持续 30-90 天。
  登革热检测试剂的检测原理:
  血清中存在的登革热病毒 IgM 抗体,与微孔测试条上聚苯乙烯表面附着的抗人 IgM 抗体结合。用抗原稀释剂将浓缩的登革热 1-4 型抗原溶液稀释到正确的工作容积。用昆虫细胞表达系统产生抗原,用特异性单克隆抗体纯化抗原。在稀释后的抗原中添加等体积的辣根过氧化物酶(HRP)标记单克隆抗体(MAb),形成抗原 MAb 复合物。清洗测定板上的剩余血清,将抗原 MAb 复合物添加到测定板中。在培养完成后清洗微孔,再添加无色的底物系统- 四甲基联苯胺/过氧化氢(TMB 显色液)。底物被酶水解后,显色液变蓝。用酸终止反应后,TMB 变黄。显色表示测试样本中存在抗登革热 IgM 抗体。
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